Madrid, 5 de Julio de 2016 .- Un protocolo de laboratorio
desarrollado por un grupo de investigadores multidisciplinar, entre los
que se encuentran miembros del Centro Nacional de Microbiología (CNM)
del Instituto de Salud Carlos III, permite mostrar la importancia de la
respuesta inmune en el desarrollo de la patología renal. La técnica ha
sido aceptada para su publicación en la revista JoVE (Journal of
Visualized Experiments), una revista que muestra on line videos sobre
cómo se realizan diferentes protocolos en el laboratorio.
El trabajo es producto de la colaboración
de un grupo multidisciplinar compuesto por investigadores del
Laboratorio de Inmunobiología del CNM (Isabel Cortegano, Mario Alía,
Belén de Andrés y Mª Luisa Gaspar), del Laboratorio de Investigación
Renal, Vascular y de Diabetes del Instituto de Investigación Sanitaria
Fundación Jiménez Díaz (Juan Antonio Moreno, Melanie Guerrero, Alfonso
Díez y Jesús Egido) y del Departamento de Fisiología de la Universidad
Complutense de Madrid (Natalia de las Heras, Elena Olivares y Beatriz
Martín)
La grabación del protocolo puesto a punto
por este equipo de investigadores se ha realizado a finales de junio
en el Laboratorio de Inmunobiología del CNM en Majadahonda. La técnica
descrita permite caracterizar los macrófagos infiltrados en muestras de
riñón de rata cuando se produce una patología renal inflamatoria.
La identificación de los mecanismos
inmunes que actúan localmente en órganos sólidos es una problemática de
gran interés para caracterizar posibles dianas terapéuticas más
específicas.
Métodos físicos y enzimáticos
El protocolo incluye la preparación de
las muestras de riñón por métodos físicos y enzimáticos. Una vez
obtenidas las células se identifican las diferentes poblaciones
celulares utilizando moléculas fluorescentes que emiten luz y que nos
permiten identificar proteínas específicas en distintas partes de la
célula características de los macrófagos. Estas muestras celulares se
analizan por citometría de flujo, una técnica con la que podemos
detectar las células marcadas con estas moléculas fluorescentes mediante
la incidencia de uno o varios láseres.
De esta forma se puede caracterizar la
población de macrófagos renales y su fenotipo en una situación
normal frente a una patológica. Esta técnica también puede aplicarse
a la detección de macrófagos tisulares en otras localizaciones.
Los macrófagos son un tipo de glóbulo
blanco que se “comen” las sustancias extrañas del organismo; están
implicados en la respuesta innata o primaria del sistema inmune ante
diferentes invasores.
Los investigadores concluyen que el
protocolo que han puesto en marcha demuestra la importancia de la
respuesta inmune en el desarrollo de la patología renal y que la
funcionalidad de las células del sistema inmune es determinante para el
buen funcionamiento del riñón. Los macrófagos tisulares pueden ser una
diana importante para el desarrollo de nuevas terapias frente al daño
renal.